ČASOPIS ČESKÉ FARMACEUTICKÉ SPOLEČNOSTI A SLOVENSKÉ FARMACEUTICKÉ SPOLEČNOSTI

Čes. slov. farm. 2017, 66(2):62-66 | DOI: 10.36290/csf.2017.008

Separácia enantiomérov fenylalanínu a metionínu metódou HPLC: porovnanie typov stacionárnych fáz

Katarína Hroboňová1,*, Anna Lomenova1, Jozef Čižmárik2, Jozef Lehotay3
1 Ústav analytickej chémie, Fakulta chemickej a potravinárskej technológie, Slovenská technická univerzita v Bratislave, Slovenská republika
2 Katedra farmaceutickej chémie, Farmaceutická fakulta, Univerzita Komenského, Slovenská republika
3 Katedra chémie, Fakulta prírodných vied, Univerzita Sv. Cyrila a Metoda v Trnave, Slovenská republika

Témou práce je enantioselektívna separácia vybraných aminokyselín metódou vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie. Separácia enantiomérnych foriem bola testovaná pomocou chirálnych stacionárnych fáz na základe β-cyklodextrínu, izopropylkarbamát cyklofruktánu 6 a makrocyklického antibiotika teikoplanínu. Najúčinnejšia enantioseparácia sa dosiahla na teikoplanínovej chirálnej stacionárnej fáze v separačnom systéme s obrátenými fázami. UV spektrofotometrická detekcia pri vlnovej dĺžke 210 nm bola použitá na detekciu aminokyselín. Na hodnotenie vhodnosti HPLC metódy sa použili linearita, medza detekcie, medza stanovenia, presnosť a výťažnosť. Medze stanoviteľnosti pre enantioméry fenylalanínu a metionínu boli 0,3 a 0,2 µg.ml-1. HPLC metóda s použitím chirálnej stacionárnej fázy na základe teikolanínu bola aplikovaná na analýzu doplnkov výživy.

Klíčová slova: separácia enantiomérov; HPLC; fenylalanín; metionín

Separation of phenylalanine and methionine enantiomers by HPLC method: a comparison of stationary phase types

The paper deals with enantioselective separation of amino acids by the high performance liquid chromatography method. Separations of enantiomeric forms were tested on the chiral stationary phases based on β-cyclodextrine, isopropyl carbamate cyclofructan 6, and the macrocyclic antibiotic teicoplanin. The best enantioseparation was obtained on the teicoplanin-based chiral stationary phase in the reversed-phase mode. UV spectrophotometric detection at 210 nm was used for detection of amino acids. The method was validated with respect to linearity, precision, limit of detection, limit of quantitation, and recovery. Limits of quantitation for phenylalanine and methionine enantiomers were 0.3 and 0.2 µg.ml-1, respectively. The HPLC method with teicoplanin-based chiral stationary phase was applied for analysis of dietary supplements.

Keywords: separation of enantiomers; HPLC; phenylalanine; methionine
Grants and funding:

Práca vznikla za podpory grantu APVV-15-0355 Agentúry na podporu výskumu a vývoja Autori ďakujú prof. D.W. Armstrongovi za poskytnutie chirálnych stacionárnych fáz Chirobiotic T a IP-CF6.

Vloženo: 14. březen 2017; Přijato: 11. duben 2017; Zveřejněno: 1. únor 2017  Zobrazit citaci

ACS AIP APA ASA Harvard Chicago Chicago Notes IEEE ISO690 MLA NLM Turabian Vancouver
Hroboňová K, Lomenova A, Čižmárik J, Lehotay J. Separácia enantiomérov fenylalanínu a metionínu metódou HPLC: porovnanie typov stacionárnych fáz. Čes. slov. farm. 2017;66(2):62-66. doi: 10.36290/csf.2017.008.
Sdílet...
Stáhnout citaci
  • BibTeX (.bib)
  • Bookends (.ris)
  • EasyBib (.ris)
  • EndNote (.enw)
  • EndNote 8 (.xml)
  • ISI WoS (.isi)
  • Medlars (.medlars)
  • Mendeley (.ris)
  • MODS (.xml)
  • Papers (.ris)
  • RefWorks (.txt)
  • RefManager (.ris)
  • RIS (.ris)
  • MS Word (.xml)
  • Zotero (.ris)
    • Zobrazit celý článek

    Reference

    1. Guo M., Shi T., Duan Y., Zhu J., Li J., Cao Y. Investigation of amino acids in wolfberry fruit (Lycium barbarum) by solid-phase extraction and liquid chromatography with precolumn derivatization. J. Food. Compos. Anal. 2015; 42, 84-90. Přejít k původnímu zdroji...
    2. Zahradníčková H., Haratvich P., Holoubek, I. Historie a význam chirálných analýz aminokyselin v biologických matricích a v životním prostředí. Chem. Listy. 2005; 99, 703-710.
    3. Brückner H., Westhauser T. Chromatographic determination of L- and D-amino acids in plants. Amino acids 2003; 24, 43-55. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    4. Shinitzky M., Nudelman F., Barda Y., Haimovitz R., Chen E., Dealer D. W. Unexpected differences between D- and L- thyrosine lead to chiral enhancement in racemic mixtures dedicated to the memory of Prof. Shneior Lifson - A great liberal thinker. Orig. Life Evol. Biosphere 2002; 32, 285-297. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    5. MacDermott A. J. Electroweak enantioselection and the origin of life. Orig. Life Evol. Biosphere 25 (1995) 191-199. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    6. Wu G. Amino Acids: Biochemistry and nutrition. Boca Raton: CRC Press 2013.
    7. Armstrong D. W., Youbang L., Ekborgott K. A covalently bonded teicoplanin chiral stationary phase for HPLC enantioseparations. Chirality 1995; 7, 474-497. Přejít k původnímu zdroji...
    8. Ilisz I., Berkecz R., Forro E., Fülöp F., Armstrong D.W., Peter A. The role of π-acidic and π-basic chiral stationary phases in the high performance liquid chromatographic enantioseparation of unusual β-amino acids. Chirality 2009; 21, 339-348. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    9. Sun P., Armstrong D. W. Effective enantiomeric separations of racemic primary amines by the isopropyl carbamate - cyclofructan 6 chiral stationary phase. J. Chromatogr. A 2010; 1217, 4904-4918. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    10. Moravčík J., Hroboňová K. Separácia enantiomérov aminokyselín metódou vysokoúčinnej kvapalinovej chromatografie. Čes. slov. Farm. 2014; 63, 4-12. Přejít k původnímu zdroji...
    11. Armstrong D. W., Tang Y., Chen S., Zhou Y., Bagwill C., Chen J.-R. Macrocyclic antibiotics as a new class of chiral selectors for liquid chromatography. Anal. Chem. 1994; 66, 1473-1484. Přejít k původnímu zdroji...
    12. Berthold A., Chen X., Kullman J. P., Armstrong D. W., Gasparrini F., D'Acquarica I., Villani C., Carotti A. Role of the carbohydrate moieties in chiral recognition on teicoplanin-based LC stationary phases. Anal. Chem. 2000; 72, 1767-1780. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    13. Lee S. H., Berthod A., Armstrong D. W. Systematic study on the resolution of derivatized amino acids enantiomers on defferent cyclodextrin-bonded stationarz phases. J. Chromatogr. 1992; 603, 83-94. Přejít k původnímu zdroji...

    Zpět na obsah


    Česká a slovenská farmacie

    Vážená paní, pane,
    upozorňujeme Vás, že webové stránky, na které hodláte vstoupit, nejsou určeny široké veřejnosti, neboť obsahují odborné informace o léčivých přípravcích, včetně reklamních sdělení, vztahující se k léčivým přípravkům. Tyto informace a sdělení jsou určena výhradně odborníkům dle §2a zákona č.40/1995 Sb., tedy osobám oprávněným léčivé přípravky předepisovat nebo vydávat (dále jen odborník).
    Vezměte v potaz, že nejste-li odborník, vystavujete se riziku ohrožení svého zdraví, popřípadě i zdraví dalších osob, pokud byste získané informace nesprávně pochopil(a) či interpretoval(a), a to zejména reklamní sdělení, která mohou být součástí těchto stránek, či je využil(a) pro stanovení vlastní diagnózy nebo léčebného postupu, ať už ve vztahu k sobě osobně nebo ve vztahu k dalším osobám.

    Prohlašuji:

    1. že jsem se s výše uvedeným poučením seznámil(a),
    2. že jsem odborníkem ve smyslu zákona č.40/1995 Sb. o regulaci reklamy v platném znění a jsem si vědom(a) rizik, kterým by se jiná osoba než odborník vstupem na tyto stránky vystavovala.

    Ne
    Ano

    Pokud vaše prohlášení není pravdivé, upozorňujeme Vás,
    že se vystavujete riziku ohrožení svého zdraví, popřípadě i zdraví dalších osob.