ČASOPIS ČESKÉ FARMACEUTICKÉ SPOLEČNOSTI A SLOVENSKÉ FARMACEUTICKÉ SPOLEČNOSTI

Čes. slov. farm. 2008, 57(6):254-259

Stanovení metoprololu a jeho metabolitu α-hydroxymetoprololu v séru metodou HPLC s fluorescenční detekcí

I. Peřinová*, J. Ďuricová, H. Brozmanová, I. Kacířová, M. Grundmann
Ostravská univerzita Ostrava, Ústav klinické farmakologie FN a Zdravotně-sociální fakulty

V práci je popsána metoda vysokoúčinné kapalinové chromatografie, která byla zavedena pro účely fenotypizace enzymu CYP2D6 metoprololem jako substrátovou látkou. Metoprolol, α-hydroxmetoprolol a nadolol (vnitřní standard) byly extrahovány ze séra dichlormethanem s přídavkem 1 mol/l NaOH. Látky byly separovány na koloně s reverzní fází SupercosilTM LC-18 (15 cm × 3 mm, 5 μm) mobilní fází o složení acetonitril : methanol : voda : triethylamin (15 : 5 : 80 : 0,1; pH 3,0) při průtoku 0,7 ml/min. Fluorescenční detekce (FL) probíhala při vlnové délce 230 nm (excitační) a 300 nm (emisní). Celková doba analýzy byla 12 min. Retenční časy byly pro α-hydroxymetoprolol (h-MET) 2,04 minut, pro nadolol (IS) 3,02 minut a pro metoprolol (MET) 9,04 minut. Přesnosti v sérii a mezi sériemi vyjádřené jako relativní směrodatné odchylky byly nižší než 7,2 % a recovery se pohybovalo v rozmezí 98,2-103,0 %. Kalibrační křivka byla lineární v rozmezí 25-500 ng/ml (r = 0,999) pro obě látky. Detekční limit byl stanoven pro metoprolol a α-hydroxymetoprolol na 5 ng/ml a kvantifikační limit na 25 ng/ml. Prezentovaná metoda může být vhodná pro analýzu metoprololu a α-hydroxymetoprololu v séru u pacientů s hypertenzí, ICHS i jiných onemocnění.

Klíčová slova: fenotypizace CYP2D6; metoprolol; α-hydroxymetoprolol; HPLC-FL

Determination of metoprolol and its metabolite α-hydroxymetoprolol in serum by HPLC method with fluorescence detection

High-performance liquid chromatography method has been developed with a view of its future use in the phenotyping of CYP2D6 enzyme by metoprolol as a probe drug. Metoprolol, α-hydroxymetoprolol and the internal standard nadolol were extracted from serum with dichloromethane alkalinized with 1 mol/l NaOH. Chromatographic separations were performed on the reversed-phase column SupercosilTM LC-18 (15 cm × 3 mm, 5 μm) with the mobile phase containing acetonitril : methanol : water : triethylamine (15 : 5 : 80 : 0.1, pH 3.0) at a flow rate of 0.7 ml/min. Fluorescence detection (FL) was made at 230 nm (excitation) and 300 nm (emission). The total analysis time was 12 min. The retention time for α-hydroxymetoprolol, nadolol and metoprolol were 2.04, 3.02 and 9.04 min, respectively. The intra-assay and inter-assay precisions (coefficients of variation) were less than 7.2 %, and recovery values were found to be within 98.2-103.0 %. The calibration curve of the method was linear over a concentration range of 25-500 ng/ml (r = 0.999) for both compounds. The limit of detection was 5 ng/ml and the limit of quantification was 25 ng/ml for both metoprolol and α-hydroxymetoprolol. The reported method could be suitable for measurements of metoprolol and α-hydroxymetoprolol in serum from patients with hypertension, IHD and other illnesses.

Keywords: phenotyping CYP2D6; metoprolol; α-hydroxymetoprolol; HPLC-FL

Vloženo: 25. srpen 2008; Přijato: 10. říjen 2008; Zveřejněno: 1. červen 2008  Zobrazit citaci

ACS AIP APA ASA Harvard Chicago Chicago Notes IEEE ISO690 MLA NLM Turabian Vancouver
Peřinová I, Ďuricová J, Brozmanová H, Kacířová I, Grundmann M. Stanovení metoprololu a jeho metabolitu α-hydroxymetoprololu v séru metodou HPLC s fluorescenční detekcí. Čes. slov. farm. 2008;57(6):254-259.
Sdílet...
Stáhnout citaci
  • BibTeX (.bib)
  • Bookends (.ris)
  • EasyBib (.ris)
  • EndNote (.enw)
  • EndNote 8 (.xml)
  • ISI WoS (.isi)
  • Medlars (.medlars)
  • Mendeley (.ris)
  • MODS (.xml)
  • Papers (.ris)
  • RefWorks (.txt)
  • RefManager (.ris)
  • RIS (.ris)
  • MS Word (.xml)
  • Zotero (.ris)
    • Zobrazit celý článek

    Reference

    1. Fux, R., Mörike, K., Pröhmer, A. M. et al.: Clin. Pharmacol. Ther., 2005; 78, 378-387. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    2. Silas, J. H., Lennard, M. S., Tucker, G. T. et al.: Br. J. Clin. Pharmacol., 1984; 17,11-19. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    3. Duricová, J., Grundmann, M.: Ces. slov. Farm., 2007; 56, 220-224.
    4. Bodor, N., Buchwald, P.: AAPS J., 2005; 7, 820-833.
    5. Ismail, R., The, L. K.: J. Clin. Pharm. Ther., 2006; 31, 99-109. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    6. Godbillon, J., Duval, M.: J. Chromatogr., 1984; 309, 198-202. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    7. Chiu, F. C., Damani, L. A., Li, R. C., Tomlinson, B.: J. Chromatogr. B. Biomed. Sci. Appl., 1997; 696, 69-74. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    8. Fang, J., Semple, H. A., Song, J.: J. Chromatogr. B. Analyt. Technol. Biomed. Life Sci., 2004; 809, 9-14. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    9. Mistry, B., Leslie, J., Eddington, N. E.: J. Pharm. Biomed. Anal., 1998; 16, 1041-1049. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    10. Sohn, D. R., Kusaka, M., Shin, S. G. et al.: Ther. Drug. Monit., 1992; 14, 184-189. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    11. Li, G., Wang, R.: Chin. Med. J., 2006; 119, 2013-2017. Přejít k původnímu zdroji...
    12. Ramenskaya, G. V., Savchenko, A. Y., Agafonov, A. A. et al.: Bull. Exp. Biol. Med., 2002; 134, 159-160. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    13. Lecaillon, J. B., Godbillon, J., Abadie, F., Gosset, G.: J. Chromatogr., 1984; 305, 411-417. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    14. Goryachkina, K., Burbello, A., Boldueva, S. et al.: Eur. J. Clin. Pharmacol., 2008; 64, 275-282. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    15. Bramer, SL., Suri, A.: Clin. Pharmacokinet., 1999; 37, 41-51. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    16. Kirchheiner, J., Heesch, C., Bauer, S. et al.: Clin. Pharmacol. Ther., 2004; 76, 302-312. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    17. Rutledge, D. R., Garrick, C.: J. Chromatogr. Sci., 1989; 27, 561-565. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    18. Asimus, S., Elsherbiny, D., Hai, T. N. et al.: Fundam. Clin. Pharmacol., 2007; 21, 307-316. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    19. Mautz, D. S., Shen, D. D., Nelson, W. L.: Pharm. Res., 1995; 12, 2053-2056. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    20. Hoffmann, K. J., Gyllenhaal, O., Vessman, J.: Biomed. Environ. Mass. Spectrom., 1987; 14, 543-548. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...
    21. Rewiewer of Guidance. Validation of Chromatographic Methods. Center of Drug Evaluation and Research (CDER), CMC 3, 1994.
    22. Guidance for Industry. Q2B Validation of Analytical Procedures: Methodology. The International Conference on Harmonisation of Thechnical Requirements for Registration of Pharmaceuticals for Human Use (ICH), 1996.
    23. Thompson, M., Ellison, S. L. R., Wood, R.: Pure Appl. Chem., 2002; 74, 835-855. Přejít k původnímu zdroji...
    24. Bievre, B. et al.: The Fitness for Purpose of Analytical Methods. A Laboratory Guide to Method Validation and Related Topics, EURACHEM Guide. 1998, s. 14.
    25. Brown, R., Caphart, M., Faustino, P. et al.: LCGC, 2001; 19, 74-79.
    26. Causon, R.: J. Chromatogr. B. Biomed. Sci. Appl., 1997; 689, 175-180. Přejít k původnímu zdroji... Přejít na PubMed...

    Zpět na obsah


    Česká a slovenská farmacie

    Vážená paní, pane,
    upozorňujeme Vás, že webové stránky, na které hodláte vstoupit, nejsou určeny široké veřejnosti, neboť obsahují odborné informace o léčivých přípravcích, včetně reklamních sdělení, vztahující se k léčivým přípravkům. Tyto informace a sdělení jsou určena výhradně odborníkům dle §2a zákona č.40/1995 Sb., tedy osobám oprávněným léčivé přípravky předepisovat nebo vydávat (dále jen odborník).
    Vezměte v potaz, že nejste-li odborník, vystavujete se riziku ohrožení svého zdraví, popřípadě i zdraví dalších osob, pokud byste získané informace nesprávně pochopil(a) či interpretoval(a), a to zejména reklamní sdělení, která mohou být součástí těchto stránek, či je využil(a) pro stanovení vlastní diagnózy nebo léčebného postupu, ať už ve vztahu k sobě osobně nebo ve vztahu k dalším osobám.

    Prohlašuji:

    1. že jsem se s výše uvedeným poučením seznámil(a),
    2. že jsem odborníkem ve smyslu zákona č.40/1995 Sb. o regulaci reklamy v platném znění a jsem si vědom(a) rizik, kterým by se jiná osoba než odborník vstupem na tyto stránky vystavovala.

    Ne
    Ano

    Pokud vaše prohlášení není pravdivé, upozorňujeme Vás,
    že se vystavujete riziku ohrožení svého zdraví, popřípadě i zdraví dalších osob.